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真核無參轉錄組測序
產品介紹 真核生物轉錄組(無參)測序,是獲得真核生物特定組織或細胞在某一狀態下轉錄出來的RNA的原始測序數據,質控后進行組裝獲得unigene,并以此為參考序列進行后續的功能注釋、SNP、SSR標記開發等分析,以及多個樣本的差異基因表達分析和差異基因功能富集分析等,發現新的功能基因,為進一步研究提供技術支撐。 針對真核生物,我們采用Illumina TruseqTM RNA sample prep Kit方法構建文庫,其流程如下圖所示:
針對無參考基因組的轉錄組研究,獲得RNA-seq高質量測序數據后,需要將所有測序讀段通過從頭組裝生成重疊群(contig)和單一序列(singleton), 此項分析是后續處理及生物學功能分析的基礎。 Trinity(http://trinityrnaseq.sourceforge.net/ , 版本號:trinityrnaseq-r2013-02-25) 是目前適用于Illumina 短片段序列組裝的一款比較權威的軟件,使用該軟件對所有clean data進行從頭組裝。 技術流程
技術優勢 1.可檢測未知基因,發現新的轉錄本; 2.豐富的項目經驗,組裝和注釋全方位分析基因表達水平和結構信息; 3.無需了解物種的基因或基因組信息,便可直接對任意物種進行全面的轉錄組分析。 送樣要求 RNA總量:≥2ug RNA濃度:≥100 ng/ul RIN值:≥7.0 分析示例 01 GO多級分類注釋分布餅圖
02 KEGG注釋統計
03 差異基因可視化散點圖及火山圖
04 上下調差異基因GO注釋柱形圖
05 SSR的分布情況
06 差異基因共表達網絡圖
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